卵巢癌肿瘤干细胞分化过程中支架蛋白IQGAP1变化的体外研究

【摘要】目的：探索支架蛋白IQGAP1在卵巢癌肿瘤干细胞的表达,并观察IQGAP1对卵巢癌肿瘤干细胞分化过程中的侵袭能力的影响。方法：以浆液性卵巢癌3AO细胞株为亲本细胞,无血清悬浮培养法获得肿瘤干细胞。采用流式细胞术验证肿瘤干细胞的标记分子CD24表达,利用细胞免疫荧光实验观察干性分子OCT4和SOX2的定位。利用含10%胎牛血清培养基诱导其分化,期间光镜下观察细胞形态变化。qRT-PCR法和Western-blot法分别检测IQGAP1mRNA和蛋白的表达水平变化。通过划痕实验和Transwell小室观察细胞迁移侵袭能力；采用wst-1法检测细胞增殖能力。结果：1.利用3AO细胞株通过无血清培养法获得表型CD24(-)表型的肿瘤干细胞。2.相比3AO细胞株中,IQGAP1在肿瘤干细胞中呈低表达。3.在3AO细胞株中,沉默IQGAP1后减弱了肿瘤迁移、侵袭能力,而不会改变细胞的增殖活性。4.在卵巢肿瘤干细胞分化过程中,OCT4和SOX2表达下降,而IQGAP1表达增加；同时肿瘤细胞的侵袭能力增强。5.在卵巢肿瘤干细胞分化过程中,IQGAP1沉默后细胞侵袭能力减弱。结论：1.无血清培养法是获得肿瘤干细胞比较成熟简便的实验技术。2.在肿瘤干细胞分化过程中其侵袭能力逐步增强,且IQGAP1可能参与了该变化。
【作者】黄璐；
【导师】吕卫国；
【作者基本信息】浙江大学，妇产科学，2014，硕士
【关键词】IQGAP1；卵巢癌；肿瘤干细胞；分化；侵袭；

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